Διαγνωστική δοκιμή μεθόδου της ELISA Olaquindox για την πάπια 96 χοιρινού κρέατος κοτόπουλου φρεάτια/ευαισθησία 0,2 εξαρτήσεων Ppb

Εξάρτηση δοκιμής της ELISA Olaquindox για την πάπια 96 χοιρινού κρέατος κοτόπουλου φρεάτια/ευαισθησία 0,2 εξαρτήσεων ppb

 

1. Αρχή

Αυτή η εξάρτηση δοκιμής είναι βασισμένη ανταγωνιστικό ενζυμικό immunoassay για την ανίχνευση ofOlaquindox στο δείγμα. Τα αντιγόνα συζεύξεων είναι καλυμμένα προηγουμένως στα λωρίδες μικροϋπολογιστής-φρεατίων. Το TheOlaquindox στο δείγμα και τα αντιγόνα συζεύξεων που καλύπτονται προηγουμένως στα λωρίδες μικροϋπολογιστής-φρεατίων ανταγωνίζονται για το αντίσωμα αντι-Olaquindox. Μετά από την προσθήκη της ενζυμικής κλίσης, το υπόστρωμα TMB προστίθεται για το χρωματισμό. Η αξία οπτικής πυκνότητας (OD) του δείγματος έχει έναν αρνητικό συσχετισμό με το Olaquindox σε το. Αυτή η αξία συγκρίνεται με την τυποποιημένη καμπύλη και η συγκέντρωση Olaquindox λαμβάνεται στη συνέχεια.

2. Τεχνικές προδιαγραφές

Ευαισθησία: 0,2 ppb
Θερμοκρασία επωαστήρων: 37℃
Χρόνος επωαστήρων: 30min~30min~15min

Όριο ανίχνευσης:
Χοιρινό κρέας, κοτόπουλο 0,2 ppb
Χοίρειο συκώτι 1 ppb
Τροφή 20ppb

Cross-reaction ποσοστό:
Olaquindox100%
Carbadox<7>

Ποσοστό αποκατάστασης:
Tissue95%±25%
Feed70%±20%

3. Συστατικά

 

1	Μικροϋπολογιστής-καλά λουρίδες	12 λουρίδες με 8 μετακινούμενα φρεάτια κάθε ένα
2	6× τυποποιημένη λύση (1 μιλ. κάθε)	0ppb	0.2ppb
		0.6ppb	1.8ppb
		5.4ppb	16.2ppb
3	Ενζυμική κλίση	12ml	κόκκινη ΚΑΠ
4	Λύση εργασίας αντισωμάτων	7ml	μπλε ΚΑΠ
5	Υπόστρωμα Α	7ml	άσπρη ΚΑΠ
6	SubstrateB	7ml	μαύρη ΚΑΠ
7	Λύση στάσεων	7ml	κίτρινη ΚΑΠ
8	συγκεντρωμένος 20× πλένοντας απομονωτής	40ml	άσπρη ΚΑΠ
9	2× που συγκεντρώνεται εκ νέου διάλυση της λύσης	50ml	διαφανής ΚΑΠ

 

4. Τα υλικά απαίτησαν αλλά παρεχόμενος

1) Εξοπλισμοί: microplate ο αναγνώστης (450nm/630nm), homogenizer, ταλαντωτής, υποβάλλει σε φυγοκέντρωση, η μέτρηση εισάγει στο σιφώνιο, άζωτο-ξεραίνοντας τη συσκευή και την ισορροπία (μια ευαισθησία αμοιβαία 0,01 γ), επωαστήρας.
2) Micropipettors: απλού διαύλου 20 σε 200µL και 100 σε 1000µL και πολυδιαυλικό 30~300µl
3) Αντιδραστήρια: Ακετονιτρίλιο, νιτροεξάνιο, Al2O3

5. Προγενέστερη επεξεργασία δειγμάτων

Οδηγίες
Τα ακόλουθα σημεία πρέπει να εξεταστούν πριν από την προγενέστερη επεξεργασία οποιουδήποτε είδους δείγματος:
1) Μόνο οι μίας χρήσης άκρες μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τα πειράματα και τις άκρες πρέπει να αλλάξουν όταν χρησιμοποιούνται για να απορροφήσουν τα διαφορετικά αντιδραστήρια
2) Πριν από το πείραμα, κάθε πειραματικό εργαλείο πρέπει να ελεγχθεί για να είναι καθαρό και πρέπει να επαν-καθαριστεί εάν είναι απαραίτητο, προκειμένου να αποφευχθεί η μόλυνση που παρεμποδίζει τα πειραματικά αποτελέσματα.

Προετοιμασία δειγμάτων
1) Λύση Sampleredissolving: Dilute2× που συγκεντρώνονται εκ νέου διάλυση της λύσης με το εξιοντισμένο νερό στις 1:1

5.1Tissues (κοτόπουλο, χοιρινό κρέας/συκώτι)
1. Πάρτε 2± 0.05g του ομογενοποιημένου δείγματος στο σωλήνα φυγοκεντρωτών 50ml, add10mLAcetonitrile (χωρίς νερό), κούνημα κατάλληλα for2min. Υποβάλτε σε φυγοκέντρωση σε above4000r/το λ. στη θερμοκρασία δωματίου (20 - 25℃) για 10min.
2. Take5mL υπερκείμενο νερό, χτύπημα για να ξεράνει με το άζωτο ή τον αέρα σε 56℃.
3. Διαλύστε το ξηρό 2mlN-εξάνιο residuesin, add1mL της αραιωμένης λύσης εκ νέου διάλυσης, mixthoroughly για τη δεκαετία του '30, υποβάλτε σε φυγοκέντρωση σε above4000r/το λ. στη θερμοκρασία δωματίου (20-25℃) for5min. Αφαιρέστε τη φάση επάνω-layerN-εξανίου.
4. Πάρτε 50 µL για την ανάλυση.
Πτυχές της διάλυσης του δείγματος: 1

5.2Feed
1. Ζυγίστε 1± που το 0,05 ομογενοποιημένο γ δείγμα στο σωλήνα φυγοκεντρωτών, προσθέτει 2gAl2O3, κατόπιν 5mlAcetonitrile, shakeviolently for3min, υποβάλλουν σε φυγοκέντρωση σε above4000r/το λ. σε 25℃ for5min
2. Take50ulsupernatant, μίγμα με 950ul η αραιωμένη εκ νέου διάλυση solutionevenly, παίρνει το υγρό επάνω-στρώματος 50µL για την ανάλυση.
Πτυχές της διάλυσης του δείγματος: 100

6. Διαδικασίες της ELISA

6.1 οδηγίες
1) Φέρτε όλες τα αντιδραστήρια και μικροϋπολογιστής-καλά τις λουρίδες στη θερμοκρασία δωματίου (20-25℃) πριν τη χρήση
2) Επιστρέψτε όλα τα αντιδραστήρια αμέσως στη μεταγενέστερη χρήση 2-8℃
3) Η δυνατότητα αναπαραγωγής της ανάλυσης της ELISA, σε μεγάλο βαθμό, εξαρτάται από τη συνέπεια της πλύσης πιάτων. Η σωστή λειτουργία της πλύσης πιάτων είναι το σημείο κλειδί στις διαδικασίες της ELISA
4) Για την επώαση στις σταθερές θερμοκρασίες, όλα τα δείγματα και τα αντιδραστήρια πρέπει να αποφύγουν την ελαφριά έκθεση, και κάθε microplate πρέπει να σφραγιστεί από τη μεμβράνη κάλυψης.

 

6.2 λειτουργική διαδικασία
1) Πάρτε έξω όλα τα απαραίτητα αντιδραστήρια και κρατήστε στη θερμοκρασία δωματίου (20-25℃) για τουλάχιστον 30min. Σημειώστε ότι κάθε αντιδραστήριο πρέπει να τιναχτεί και να αναμιχθεί καλά πριν τη χρήση
2) Πάρτε το επιθυμητό microwell πλαίσιο λουρίδων και πιάτων. Τα αχρησιμοποίητα microplates πρέπει να ξανασφραγιστούν και να αποθηκευτούν σε 2-8°C
3) Προετοιμασία λύσης: Αραιώστε 40 μιλ. συγκεντρωμένου του 20× πλένοντας απομονωτή με το εξιοντισμένο νερό στις 1:19 (1 μέρος 20× συγκέντρωσε τον απομονωτή πλύσης + 19 μέρη του εξιοντισμένου νερού), ή προετοιμαστείτε όπως απαιτείται
4) Αρίθμηση: Αριθμός τα microwells σύμφωνα με τα δείγματα και τις τυποποιημένες λύσεις κάθε δείγμα και η τυποποιημένη λύση πρέπει να γίνουν εις διπλούν καταγράψτε τις θέσεις τους
5) Προσθέστε 50 µL του δείγματος ή της τυποποιημένης λύσης στα χωριστά φρεάτια, και προσθέστε έπειτα 50 µL της λύσης εργασίας αντισωμάτων σε κάθε μια καλά. Το κούνημα ήπια που αναμιγνύει καλά, καλύπτει το microplate με μια ταινία κάλυψης, και επωάζει σε 37°C για 30 λ.
6) Πλύντε το microplate 4-5 φορές με 250 µL/well του απομονωτή πλύσης ενυδατώστε τα φρεάτια στον απομονωτή πλύσης για 15-30 δευτερόλεπτα, και το ελαφρύ κτύπημα ξηρό με το απορροφητικό έγγραφο (εάν οποιεσδήποτε αεροφυσαλίδες βρίσκονται μετά από να τρυπήσουν, που κόβονται με μια καθαρή άκρη σιφωνίων))
7) Προσθέστε 100 µL της ενζυμικής κλίσης σε κάθε μια καλά, τινάξτε και αναμίξτε ήπια, καλύψτε το microplate με μια ταινία κάλυψης, και επωάστε σε 37°C για 30 λ. χύστε έξω το υγρό από καλά, πλύντε το microplate με τον απομονωτή πλύσης, και συνεχίστε να περπατείτε 6).
8) Ανάπτυξη χρώματος: Προσθέστε 50 µL της λύσης υποστρωμάτων Α και 50 µL της λύσης Β σε κάθε μια καλά. Ήπια τινάξτε και αναμίξτε, και επωάστε σε 37°C για 15 λεπτά στο σκοτάδι για την ανάπτυξη χρώματος
9) Δοκιμή: Προσθέστε 50 µL της λύσης στάσεων σε κάθε μια καλά. Κούνημα ήπια που αναμιγνύει. Θέστε το μήκος κύματος του αναγνώστη microplate σε 450nm για να καθορίσετε την αξία OD. (Συστήνεται να διαβαστεί η αξία OD στο διπλό μήκος κύματος 450/630nm μέσα σε 5 λεπτά).

 

7. Κρίση αποτελέσματος

Υπάρχουν δύο μέθοδοι για να κρίνουν τα αποτελέσματα ο πρώτος είναι η τραχιά κρίση, ενώ ο δεύτερος είναι ο ποσοτικός προσδιορισμός. Σημειώστε ότι η αξία OD του δείγματος έχει έναν αρνητικό συσχετισμό με τον ικανοποιημένο ofOlaquindox.

7.1 ποιοτικός προσδιορισμός
Το διάστημα συγκέντρωσης (ng/mL) μπορεί να ληφθεί από τη σύγκριση τη μέση αξία OD του δείγματος με αυτήν της τυποποιημένης λύσης. Να υποθέσουν ότι η αξία OD του δείγματοςⅠ είναι 0,3, και αυτό του δείγματος Ⅱ είναι 1,0, ενώ εκείνοι των τυποποιημένων λύσεων είναι ως εξής: 2,243 για 0ppb, 1,816 for0.2ppb, 1,415 for0.6ppb, 0,74 for1.8ppb, 0,313 for5.4ppb και 0,155 for16.2ppb, αναλόγως το διάστημα συγκέντρωσης του δείγματος Ⅰ is5.4 to16.2ppb, και αυτό του δείγματος Ⅱ is0.6 σε 1.8ppb.

7.2 ποσοτικός προσδιορισμός
Οι μέσες τιμές των τιμών απορροφητικότητας είναι ισοδύναμες με το ποσοστό της μέσης αξίας OD (β) του δείγματος και της τυποποιημένης λύσης που διαιρούνται με την αξία OD (B0) της πρώτης τυποποιημένης λύσης (πρότυπα 0) και που πολλαπλασιάζονται στη συνέχεια με 100%, δηλ.,

 

Ποσοστό της αξίας απορροφητικότητας =	Β	×100%
	B0

 

Η β-μέση (διπλά φρεάτια) αξία OD του δείγματος ή της τυποποιημένης λύσης
B0-μέση αξία OD της τυποποιημένης λύσης 0 ng/mL
Σύρετε την τυποποιημένη καμπύλη με τα ποσοστά απορρόφησης των τυποποιημένων λύσεων και τις τιμές semilogarithm των τυποποιημένων λύσεων Olaquindox (ng/mL) ως Υ και Χ-άξονα, αντίστοιχα. Διαβάστε την αντίστοιχη συγκέντρωση του δείγματος από την τυποποιημένη καμπύλη με την ενσωμάτωση του ποσοστού απορρόφησής του στην τυποποιημένη καμπύλη. Η προκύπτουσα αξία πολλαπλασιάζεται στη συνέχεια με τις αντίστοιχες πτυχές διαλύσεων, κατά συνέπεια λαμβάνοντας τελικά τη συγκέντρωση Olaquindox στο δείγμα.
Η χρησιμοποίηση του επαγγελματία που αναλύει το λογισμικό αυτής της εξάρτησης θα είναι καταλληλότερη για την ακριβή και γρήγορη ανάλυση των δειγμάτων ενός μεγάλου ποσού. (Παρακαλώ μας ελάτε σε επαφή με για αυτό το λογισμικό)

8. Προφυλάξεις

1. Η θερμοκρασία δωματίου κάτω από 25 ℃ ή η θερμοκρασία του μη επιστροφής των αντιδραστηρίων και των δειγμάτων στη θερμοκρασία δωματίου (20-25 ℃) θα οδηγήσει σε μια χαμηλότερη τυποποιημένη αξία OD
2. Η ξηρότητα του microplate στη διαδικασία πλύσης θα συνοδευθεί από τις καταστάσεις συμπεριλαμβανομένων των μη γραμμικών τυποποιημένων καμπυλών και της ανεπιθύμητης δυνατότητας αναπαραγωγής
3. Αναμίξτε κάθε αντιδραστήριο και μίγμα αντίδρασης ομοιόμορφα και πλύντε το microplate λεπτομερώς, διαφορετικά θα υπάρξει η ανεπιθύμητη δυνατότητα αναπαραγωγής
4. Η λύση στάσεων είναι τα 2 Μ το διάλυμα που θειικού οξέος, αποφεύγει με το δέρμα
5. Βάλτε το αχρησιμοποίητο microplate σε μια αυτόματος-σφραγίζοντας τσάντα για να το ξανασφραγίσετε. Η τυποποιημένη ουσία και το άχρωμο χρώμα προηγούμενες είναι φωτοευαίσθητες, και έτσι δεν μπορούν να εκτεθούν άμεσα στο φως
6. Μην χρησιμοποιήστε την εξάρτηση που υπερβαίνει την ημερομηνία λήξης του. Η χρήση των αραιωμένων ή αλλοιωμένων αντιδραστηρίων από τις εξαρτήσεις θα οδηγήσει στις αλλαγές στην ευαισθησία και τις τιμές ανίχνευσης OD. Μην ανταλλάξτε τα αντιδραστήρια από τις εξαρτήσεις των διαφορετικών αριθμών μερών στη χρήση
7. Απορρίψτε τη λύση χρωματισμού με οποιοδήποτε χρώμα που δείχνει τον εκφυλισμό αυτής της λύσης. Η αξία ανίχνευσης της τυποποιημένης λύσης 0 λιγότερο από 0,5 δείχνει τον εκφυλισμό της
8. Η βέλτιστη θερμοκρασία αντίδρασης είναι 37 ℃, και οι πάρα πολύ υψηλές ή πάρα πολύ χαμηλές θερμοκρασίες θα οδηγήσουν στις αλλαγές στις τιμές ευαισθησίας ανίχνευσης και OD.

9. Ημερομηνία αποθήκευσης και λήξης

Αποθήκευση: κατάστημα σε 2-8 ℃, παγωμένο.
Ημερομηνία λήξης: 12 μήνες η ημερομηνία της παραγωγής είναι στο κιβώτιο.
Σημείωση: Εάν Vacuum package του microplate έχει τη διαρροή, ισχύει ακόμα να χρησιμοποιήσει, δεν έχει επιπτώσεις στο αποτέλεσμα της δοκιμής, να είναι χαλαρώστε στη χρήση.

 

 

 

 

 

Q1: Πότε θα σταλεί;
Α1: Θα στείλουμε τα αγαθά για σας το συντομότερο δυνατό μέσα σε 7 εργάσιμες ημέρες μετά από να λάβουμε την πληρωμή. (Σε περίπτωση εξωτερικών παραγόντων όπως η επιδημία, την παράδοση μπορεί να καθυστερήσουν)

 

Q2: Υποστηρίζει OEM/ODM;
A2: Μπορεί να υποστηριχθεί, αλλά η συγκεκριμένη ποσότητα πρέπει να είναι περισσότερα από 100.000 κομμάτια, το οποίο είναι κατάλληλο για τα προσαρμοσμένα προϊόντα.

 

Q3: Πώς το εργοστάσιό σας κάνει από την άποψη του ποιοτικού ελέγχου;
A3: Έχουμε πιστοποιήσει εθνικά ISO9001 και ISO13485. Η διαδικασία παραγωγής μας προσαρμόζεται στις τυποποιημένες διαδικασίες για να εξασφαλίσει βέλτιστη ποιότητα των προϊόντων.

 

Q4: Πώς να παρέχει την υπηρεσία μεταπωλήσεων;
A4: Παρέχουμε την επαγγελματική σε απευθείας σύνδεση τεχνική υπηρεσία μεταπωλήσεων. Μπορούμε να παρέχουμε σε σας την καθοδήγηση ενών προς έναν μέσω του βίντεο, του τηλεφώνου, κ.λπ.

 

Q5: Ποια είναι η μέθοδος πληρωμής;
A5: Λαμβάνουμε την πληρωμή από T/T.

 

Q6: Πώς να στείλει;
A6: Επιλέξτε την καλύτερη μέθοδο ναυτιλίας για σας με να πάρει τα αποσπάσματα από τους πολλούς συνεταιριστικούς μεταφορείς μας, και επίσης το σκάφος σύμφωνα με τις απαιτήσεις σας.