Γρήγορη εξάρτηση ανίχνευσης αντισωμάτων της ELISA Metronidazole για το μέλι 96 φρεάτια/ευαισθησία 0,05 εξαρτήσεων Ppb

Εξάρτηση δοκιμής της ELISA Metronidazole για το μέλι 96 φρεάτια/ευαισθησία 0,05 εξαρτήσεων ppb

 

1. Αρχή

Αυτή η εξάρτηση δοκιμής είναι βασισμένη ανταγωνιστικό ενζυμικό immunoassay για την ανίχνευση Metronidazole στο δείγμα. Τα αντιγόνα συζεύξεων είναι καλυμμένα προηγουμένως στα λωρίδες μικροϋπολογιστής-φρεατίων. Το Metronidazole στο δείγμα και τα αντιγόνα συζεύξεων που καλύπτονται προηγουμένως στα λωρίδες μικροϋπολογιστής-φρεατίων ανταγωνίζονται για τα αντι αντισώματα Metronidazole. Μετά από την προσθήκη της ενζυμικής κλίσης, το υπόστρωμα TMB προστίθεται για το χρωματισμό. Η αξία οπτικής πυκνότητας (OD) του δείγματος έχει έναν αρνητικό συσχετισμό με το Metronidazole σε το. Αυτή η αξία συγκρίνεται με την τυποποιημένη καμπύλη και η συγκέντρωση Metronidazole λαμβάνεται στη συνέχεια.

2. Τεχνικές προδιαγραφές

Ευαισθησία: 0.05ppb
Όριο ανίχνευσης
Μέλι: περίπου 0.1ppb
Σημείωση: ppb= ng/ml ή ng/g

Cross-reaction ποσοστό:
Metronidazole 100%
Ornidazole 83%
Secnidazole 110%
Metronidazole-OH <1> Tinidazole <1> Dimetridazole <1>

Ποσοστό αποκατάστασης: 90±30%
 

3. Συστατικά

 

1	Μικροϋπολογιστής-καλά λουρίδες	12 λουρίδες με 8 μετακινούμενα φρεάτια κάθε ένα
2	6× τυποποιημένη λύση (1mL κάθε ένα)	ppb 0	0,05 ppb
		0,15 ppb	0,45 ppb
		1.35 ppb	4.05 ppb
3	Ενζυμική κλίση	12 μιλ.	κόκκινη ΚΑΠ
4	Λύση εργασίας αντισωμάτων	7 μιλ.	μπλε ΚΑΠ
5	Υπόστρωμα Α	7 μιλ.	άσπρη ΚΑΠ
6	SubstrateB	7 μιλ.	μαύρη ΚΑΠ
7	Λύση στάσεων	7 μιλ.	κίτρινη ΚΑΠ
8	συγκεντρωμένος 20× πλένοντας απομονωτής	30 μιλ.	άσπρη ΚΑΠ
9	Εκ νέου διάλυση της λύσης	50 μιλ.	διαφανής ΚΑΠ

 

4. Τα υλικά απαίτησαν αλλά παρεχόμενος

1) Εξοπλισμοί: microplate ο αναγνώστης (450nm, 630nm), εκτυπωτής, άζωτο-ξεραίνοντας συσκευή, δίνη, δονητής, υποβάλλει σε φυγοκέντρωση (3000g και ανωτέρω), η μέτρηση εισάγει στο σιφώνιο, ισορροπία (μια αμοιβαία ευαισθησία 0,01 γ), επωαστήρας (4℃, 25℃), νερό - λουτρό, χρονόμετρο
2) Micropipettors: απλού διαύλου 20-200 µL, 100-1000 µL, και οκτώ-κανάλι 30~300 µl
3) Αντιδραστήρια (AR): Na2HPO412H2O▪, NaH2PO4·2H2O, αιθυλικό οξικό άλας, εξάνιο, ηξιόντισε το νερό.

5. Προγενέστερη επεξεργασία δειγμάτων

Οδηγίες
Τα ακόλουθα σημεία πρέπει να εξεταστούν πριν από την προγενέστερη επεξεργασία οποιουδήποτε είδους δείγματος:
1) Μόνο οι μίας χρήσης άκρες μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τα πειράματα και τις άκρες πρέπει να αλλάξουν όταν χρησιμοποιούνται για να απορροφήσουν τα διαφορετικά αντιδραστήρια
2) Πριν από το πείραμα, κάθε πειραματικός εξοπλισμός πρέπει να είναι καθαρός και πρέπει να επαν-καθαριστεί εάν είναι απαραίτητο, προκειμένου να αποφευχθεί η μόλυνση που παρεμποδίζει τα πειραματικά αποτελέσματα.

Προετοιμασία λύσης πριν από την προγενέστερη επεξεργασία δειγμάτων:
1) Απομονωτής πλύσης: συγκεντρωμένος 20× πλένοντας απομονωτής 1 μέρους + 19 μέρη εξιοντισμένου νερού.
2) απομονωτής φωσφορικού άλατος 0.2M: ζυγίστε 25.8g Na2HPO412H2O▪, 4.350g NaH2PO4·2H2O, προσθέστε εξιοντισμένο το 500ml νερό που διαλύει εντελώς.
 

5.1 προετοιμασία δειγμάτων
Μέλι
1) Ζυγίστε το δείγμα μελιού 2.0± 0.05g στον πλαστικό σωλήνα φυγοκεντρωτών 50ml
2) Προσθέστε 2ml που 0.2M απομονωτής φωσφορικού άλατος, κατόπιν προσθέτουν το αιθυλικό οξικό άλας 8ml, κούνημα έντονα για 5min (ή δίνη χρήσης για 3min) για να κάνουν την επαφή δειγμάτων με την οργανική φάση εντελώς
3) Υποβάλτε σε φυγοκέντρωση επάνω από 3000 γ στη θερμοκρασία δωματίου για 5min
4) Σαφές υγρό επάνω-στρώματος μεταφοράς 4ml στο σωλήνα φυγοκεντρωτών 5ml (σημείωση: μην πάρτε τη φάση νερού κάτω-στρώματος), φυσά για να ξεράνει στο νερό 50-60℃ - λουτρό
5) Προσθέστε το εξάνιο 1ml και 0.5ml ξαναδιαλύοντας τη λύση αναλόγως, κούνημα έντονα για 2min (ή δίνη χρήσης για 1min)
6) Υποβάλτε σε φυγοκέντρωση επάνω από 3000 γ στη θερμοκρασία δωματίου για 5min
7) Απορρίψτε την οργανική φάση επάνω-στρώματος, πάρτε το υγρό κάτω-στρώματος 50ul στη δοκιμή.
Πτυχές της διάλυσης του δείγματος: 0,5

6. Διαδικασίες της ELISA

6.1 οδηγίες
1) Φέρτε όλες τα αντιδραστήρια και μικροϋπολογιστής-καλά τις λουρίδες στη θερμοκρασία δωματίου (20-25 ℃) πριν τη χρήση
2) Επιστρέψτε όλα τα αντιδραστήρια αμέσως στη μεταγενέστερη χρήση 2-8 ℃
3) Η δυνατότητα αναπαραγωγής της ανάλυσης της ELISA, σε μεγάλο βαθμό, εξαρτάται από τη συνέπεια της πλύσης πιάτων. Η σωστή λειτουργία της πλύσης πιάτων είναι το σημείο κλειδί στη ELISA οι διαδικασίες
4) Για την επώαση στις σταθερές θερμοκρασίες, όλα τα δείγματα και τα αντιδραστήρια πρέπει να αποφύγουν την ελαφριά έκθεση, και κάθε microplate πρέπει να σφραγιστεί από τη μεμβράνη κάλυψης.

6.2 διαδικασίες λειτουργίας
1. Φέρτε την εξάρτηση δοκιμής στη θερμοκρασία δωματίου (20-25 ℃) για τουλάχιστον 30 λ., σημειώνει ότι κάθε αντιδραστήριο πρέπει να τιναχτεί για να αναμίξει ομοιόμορφα πριν τη χρήση, έβαλε τις απαραίτητες μικροϋπολογιστής-καλά λουρίδες στα πλαίσια πιάτων. Ξανασφράγισε το αχρησιμοποίητο microplate, κατάστημα σε 2-8 ℃, παγωμένο.
2. Αρίθμηση: αριθμός τα μικροϋπολογιστής-φρεάτια σύμφωνα με τα δείγματα και την τυποποιημένη λύση κάθε δείγμα και η τυποποιημένη λύση πρέπει να εκτελεσθούν εις διπλούν, να καταγράψουν τις θέσεις τους.
3. Προσθέστε 50 µL του δείγματος ή της τυποποιημένης λύσης στα χωριστά διπλά φρεάτια κατόπιν προσθέστε 50 µL της λύσης εργασίας αντισωμάτων σε κάθε μια καλά, μίγμα ήπια με να τινάξει το πιάτο με το χέρι. Σφραγίστε το microplate με τη μεμβράνη κάλυψης, και επωάστε σε 4 ℃ για 60min στο σκοτάδι.
4. Χύστε το υγρό από το microwell, προσθέστε 250 µL/well του απομονωτή πλύσης στο πλύσιμο microplate για 15-30 s, κατόπιν χύστε τον απομονωτή πλύσης από το microwell, προσθέστε τον απομονωτή πλύσης στο πλύσιμο κατά αυτόν τον τρόπο για 3-4 φορές, κατόπιν πάρτε έξω και χτυπήστε για να ξεράνετε με το απορροφητικό έγγραφο.
5. Προσθέστε την ενζυμική κλίση 100ul (μην βάλτε το microplate στη θερμοκρασία δωματίου για μακροπρόθεσμο μετά από να πλύνει το βήμα για να αποφύγει την ξηρότητα του μολύβδου microplate στη διαφορά του αποτελέσματος), μίγμα ήπια με να τινάξει το πιάτο με το χέρι. Σφραγίστε το microplate με τη μεμβράνη κάλυψης, και επωάστε σε 25 ℃ για 20min στο σκοτάδι. Πλύσιμο ως βήμα 4.
6. Χρωματισμός: προσθέστε το μίγμα 100ul λύσης υποστρωμάτων Α και λύσης υποστρωμάτων Β σε κάθε μια καλά (σημείωση: αναμίξτε τη λύση υποστρωμάτων Α και η λύση υποστρωμάτων Β στις 1:1, χρησιμοποιεί το μίγμα σε 10min, δεν χρησιμοποιεί το μέταλλο για να περιέχει ή να ανακατώσει, για να αποφύγει το υπόστρωμα άκυρο). Το μίγμα ήπια με να τινάξει το πιάτο με το χέρι, σφραγίζει το microplate με τη μεμβράνη κάλυψης κατόπιν επωάζει σε 25 ℃ για 15 λ. στο σκοτάδι για το χρωματισμό.
7. Προσδιορισμός: προσθέστε 50 µL της λύσης στάσεων σε κάθε μια καλά. Μίγμα ήπια με να τινάξει το πιάτο με το χέρι. Στάση επιτυχώς όταν χρώμα υποστρωμάτων από μπλε σε κίτρινο. Συστήστε να διαβάσετε στην αξία OD στο διπλός-μήκος κύματος το 450/630 NM μέσα σε 5 λεπτά.

 

7. Κρίση αποτελέσματος

Υπάρχουν δύο μέθοδοι για να κρίνουν τα αποτελέσματα: ο πρώτος είναι η τραχιά κρίση, ενώ ο δεύτερος είναι ο ποσοτικός προσδιορισμός. Σημειώστε ότι η αξία OD του δείγματος έχει έναν αρνητικό συσχετισμό με τη συγκέντρωση Metronidazole.

7.1 ποιοτικός προσδιορισμός
Το διάστημα συγκέντρωσης (ng/mL) Metronidazole μπορεί να ληφθεί από τη σύγκριση της μέσης αξίας OD του δείγματος με αυτήν της τυποποιημένης λύσης. Να υποθέσουν ότι η αξία OD του δείγματοςⅠ είναι 0,3, και αυτό του δείγματος Ⅱ είναι 1,0, η αξία OD των τυποποιημένων λύσεων είναι: 2,243 για 0ppb, 1,816 για 0.05ppb, 1,415 για 0.15ppb, 0,74 για 0.45ppb, 0,313 για 1.35ppb, 0,155 για 4.05ppb, κατά συνέπεια το διάστημα συγκέντρωσης του δείγματος Ⅰ είναι 1,35 σε 4.05ppb, και αυτό του δείγματος Ⅱ είναι 0,05 σε 0.45ppb.

7.2 ποσοτικός προσδιορισμός
Οι μέσες τιμές των τιμών απορροφητικότητας λαμβάνονται για τη μέση αξία OD (β) του δείγματος και της τυποποιημένης λύσης που διαιρούνται με την αξία OD (B0) της πρώτης τυποποιημένης λύσης (πρότυπα 0) και που πολλαπλασιάζονται στη συνέχεια με 100%, δηλ.,

 

Ποσοστό της αξίας απορροφητικότητας =	Β	×100%
	B0

 

Η β-μέση αξία OD του δείγματος ή της τυποποιημένης λύσης
B0-μέση αξία OD της τυποποιημένης λύσης 0 ng/mL
Σύρετε την τυποποιημένη καμπύλη με τα ποσοστά απορρόφησης της τυποποιημένης λύσης και τις τιμές semilogarithm της τυποποιημένης λύσης Metronidazole (ng/mL) ως Υ και Χ-άξονα, αντίστοιχα. Διαβάστε την αντίστοιχη συγκέντρωση του δείγματος από την τυποποιημένη καμπύλη με την ενσωμάτωση του ποσοστού απορρόφησής του στην τυποποιημένη καμπύλη. Η προκύπτουσα αξία πολλαπλασιάζεται στη συνέχεια με τις αντίστοιχες πτυχές διαλύσεων, λαμβάνοντας τελικά τη συγκέντρωση Metronidazole στο δείγμα.
Η χρησιμοποίηση του επαγγελματία που αναλύει το λογισμικό αυτής της εξάρτησης θα είναι καταλληλότερη για την ακριβή και γρήγορη ανάλυση των δειγμάτων ενός μεγάλου ποσού. (Παρακαλώ μας ελάτε σε επαφή με για αυτό το λογισμικό).

8. Προφυλάξεις

1. Η θερμοκρασία δωματίου κάτω από 25 ℃ ή η θερμοκρασία του μη επιστροφής των αντιδραστηρίων και των δειγμάτων στη θερμοκρασία δωματίου (20-25 ℃) θα οδηγήσει σε μια χαμηλότερη τυποποιημένη αξία OD.
2. Η ξηρότητα του microplate στη διαδικασία πλύσης θα συνοδευθεί από τις καταστάσεις συμπεριλαμβανομένων των μη γραμμικών τυποποιημένων καμπυλών και της ανεπιθύμητης δυνατότητας αναπαραγωγής Έτσι συνεχίστε να περπατείτε έπειτα αμέσως μετά από την πλύση.
3. Μίγμα ομοιόμορφα, διαφορετικά θα υπάρξει η ανεπιθύμητη δυνατότητα αναπαραγωγής.
4. Η λύση στάσεων είναι τα 2 Μ το διάλυμα που θειικού οξέος, αποφεύγει με το δέρμα.
5. Μην χρησιμοποιήστε την εξάρτηση που υπερβαίνει την ημερομηνία λήξης του. Η χρήση των αραιωμένων ή αλλοιωμένων αντιδραστηρίων από τις εξαρτήσεις θα οδηγήσει στις αλλαγές στην ευαισθησία και τις τιμές ανίχνευσης OD. Μην ανταλλάξτε τα αντιδραστήρια από τις εξαρτήσεις των διαφορετικών μερών στη χρήση.
6. Βάλτε το αχρησιμοποίητο microplate σε μια αυτόματος-σφραγίζοντας τσάντα για να το ξανασφραγίσετε. Η τυποποιημένη λύση και το άχρωμο χρώμα προηγούμενες είναι φωτοευαίσθητες, και έτσι δεν μπορούν να εκτεθούν άμεσα στο φως.
7. Απορρίψτε τη λύση χρωματισμού με οποιοδήποτε χρώμα που δείχνει τον εκφυλισμό αυτής της λύσης. Η αξία ανίχνευσης της τυποποιημένης λύσης 1 (ppb 0) λιγότερο από 0,5 δείχνει τον εκφυλισμό της.

9. Ημερομηνία αποθήκευσης και λήξης

Αποθήκευση: κατάστημα σε 2-8 ℃, παγωμένο.
Ημερομηνία λήξης: 12 μήνες η ημερομηνία της παραγωγής είναι στο κιβώτιο.

 

 

 

 

 

 

Q1: Πότε θα σταλεί;
Α1: Θα στείλουμε τα αγαθά για σας το συντομότερο δυνατό μέσα σε 7 εργάσιμες ημέρες μετά από να λάβουμε την πληρωμή. (Σε περίπτωση εξωτερικών παραγόντων όπως η επιδημία, την παράδοση μπορεί να καθυστερήσουν)

 

Q2: Υποστηρίζει OEM/ODM;
A2: Μπορεί να υποστηριχθεί, αλλά η συγκεκριμένη ποσότητα πρέπει να είναι περισσότερα από 100.000 κομμάτια, το οποίο είναι κατάλληλο για τα προσαρμοσμένα προϊόντα.

 

Q3: Πώς το εργοστάσιό σας κάνει από την άποψη του ποιοτικού ελέγχου;
A3: Έχουμε πιστοποιήσει εθνικά ISO9001 και ISO13485. Η διαδικασία παραγωγής μας προσαρμόζεται στις τυποποιημένες διαδικασίες για να εξασφαλίσει βέλτιστη ποιότητα των προϊόντων.

 

Q4: Πώς να παρέχει την υπηρεσία μεταπωλήσεων;
A4: Παρέχουμε την επαγγελματική σε απευθείας σύνδεση τεχνική υπηρεσία μεταπωλήσεων. Μπορούμε να παρέχουμε σε σας την καθοδήγηση ενών προς έναν μέσω του βίντεο, του τηλεφώνου, κ.λπ.

 

Q5: Ποια είναι η μέθοδος πληρωμής;
A5: Λαμβάνουμε την πληρωμή από T/T.

 

Q6: Πώς να στείλει;
A6: Επιλέξτε την καλύτερη μέθοδο ναυτιλίας για σας με να πάρει τα αποσπάσματα από τους πολλούς συνεταιριστικούς μεταφορείς μας, και επίσης το σκάφος σύμφωνα με τις απαιτήσεις σας.