30min εξεταστικές εξαρτήσεις μυκοτοξινών της Elisa φυστικιών αφλατοξινών για τον ιστό 96 φρεάτια/εξάρτηση καλαμποκιού

Συνολική εξάρτηση δοκιμής της ELISA αφλατοξινών για τον ιστό 96 φρεάτια/εξάρτηση φυστικιών καλαμποκιού τροφών

 

1. Εξεταστική αρχή εξαρτήσεων μυκοτοξινών

Αυτή η εξάρτηση είναι βασισμένη έμμεσο ανταγωνιστικό ενζυμικό immunoassay για την ανίχνευση των συνολικών αφλατοξινών. Τα κλιμένα αντιγόνα είναι καλυμμένα προηγουμένως στις λουρίδες microwell. Η αφλατοξίνη στο δείγμα ανταγωνίζεται με το κλιμένο αντιγόνο που καλύπτεται προηγουμένως στη λουρίδα microwell για τα αντισώματα αντι-αφλατοξίνης. Αφότου προστίθεται η ενζυμική κλίση, το υπόστρωμα TMB προστίθεται για το λέκιασμα. Η αξία οπτικής πυκνότητας (OD) ενός δείγματος συσχετίζεται αρνητικά με την αφλατοξίνη στο δείγμα. Αυτή η αξία συγκρίνεται με μια τυποποιημένη καμπύλη, και το υπόλοιπο επίπεδο αφλατοξίνης λαμβάνεται έπειτα.

 

2. Τεχνικές προδιαγραφές

Ευαισθησία: 0,02 ppb
Θερμοκρασία επωαστήρων: 25℃
Χρόνος πολιτισμού: 30min~15min
Όριο ανίχνευσης:
Τροφή, ρύζι, καλαμπόκι, φυστίκι, ιστός, λάδι 2ppb
Ποσοστό διαγώνιας αντίδρασης:
Αφλατοξίνη B1 100%
Αφλατοξίνη M1 91,2%
Αφλατοξίνη B2 68,4%
Αφλατοξίνη G1 4,7%
Αφλατοξίνη G2 2,7%
Ποσοστό αποκατάστασης:
Τροφή, ρύζι, καλαμπόκι, φυστίκι, ιστός, λάδι 95±35%

 

3. Τμήματα εξαρτήσεων δοκιμής μυκοτοξινών

 

1	Μικροϋπολογιστής-καλά λουρίδες	12 λουρίδες με 8 μετακινούμενα φρεάτια κάθε μια
2	6× τυποποιημένη λύση (1 μιλ. κάθε)	0ppb	0.02ppb
		0.06ppb	0.18ppb
		0.54ppb	1.62ppb
3	Ενζυμική κλίση	7ml	κόκκινη ΚΑΠ
4	Λύση εργασίας αντισωμάτων	7ml	μπλε ΚΑΠ
5	Υπόστρωμα Α	7ml	άσπρη ΚΑΠ
6	Υπόστρωμα Β	7ml	μαύρη ΚΑΠ
7	Λύση στάσεων	7ml	κίτρινη ΚΑΠ
8	συγκεντρωμένος 20× πλένοντας απομονωτής	40ml	άσπρη ΚΑΠ
9	20× που συγκεντρώνεται εκ νέου διάλυση της λύσης	50ml	διαφανής ΚΑΠ

 

4. Προετοιμασία δειγμάτων

Οδηγίες για τη χρήση (τα ακόλουθα σημεία πρέπει να εξεταστούν πρίν προεπεξεργάζονται)
1) Το πείραμα μπορεί μόνο να χρησιμοποιήσει τις μίας χρήσης άκρες, και οι άκρες πρέπει να αντικατασταθούν κατά την απορρόφηση των διαφορετικών αντιδραστηρίων
2) Πριν από το πείραμα, κάθε πειραματικό εργαλείο πρέπει να καθαριστεί και να επαν-καθαριστεί εάν είναι απαραίτητο για να αποφύγει τη μόλυνση τα πειραματικά αποτελέσματα.

Προετοιμασία λύσης πριν από την προεπεξεργασία δειγμάτων:
1) Λύση διάλυσης δειγμάτων
Η χρήση 1 μέρος 20X συγκέντρωσε την εκ νέου διάλυση της λύσης και διαλύει με 19 μέρη εξιοντισμένου νερού για να λάβει ένα έτοιμο προς χρήση δείγμα που ξαναδιαλύει τη λύση.
2) Απόσπασμα δειγμάτων
Η χρήση 7 μέρη μεθανόλης και διαλύει σε 3 μέρη εξιοντισμένου νερού για ένα έτοιμο προς χρήση απόσπασμα δειγμάτων.

Προετοιμασία δειγμάτων
4.1 προετοιμασία των δειγμάτων ιστού, τροφών, ρυζιού και αραβόσιτου
1) Τεθειμένα 1.0±0.05g του επίγειου δείγματος σε έναν σωλήνα φυγοκεντρωτών 50ml, προσθέτουν 5ml του αποσπάσματος δειγμάτων, τινάζουν για 3min, υποβάλλουν σε φυγοκέντρωση σε 20°C για 10min επάνω από 4000r/min
2) Πάρτε το υπερκείμενο νερό 100ul, προσθέστε το δείγμα 700ul που ξαναδιαλύει τη λύση, κούνημα καλά
3) Πάρτε 50μl για τη δοκιμή
Παράγοντας διαλύσεων: 40

4.2 προετοιμασία των δειγμάτων λαδιού
1) Πάρτε το δείγμα λαδιού 1.0±0.05g σε έναν σωλήνα φυγοκεντρωτών 50ml προσθέστε 5ml του αποσπάσματος δειγμάτων, κατόπιν προσθέστε 4ml του νιτροεξάνιου, τινάξτε για 3min, υποβάλτε σε φυγοκέντρωση σε 4000r/min σε 20℃ για 10min
2) Απορρίψτε το υπερκείμενο νερό, πάρτε 100ul της μέσης λύσης στρώματος, προσθέστε 700ul του δείγματος που ξαναδιαλύει τη λύση, και το κούνημα καλά
3) Πάρτε 50μl για τη δοκιμή
Παράγοντας διαλύσεων: 40

4.3 προετοιμασία των δειγμάτων φυστικιών
1) Τεθειμένο συντριμμένο φυστίκι δείγμα 1.0±0.05g σε έναν σωλήνα φυγοκεντρωτών 50ml προσθέστε 5ml του αποσπάσματος δειγμάτων, κατόπιν προσθέστε 4ml του νιτροεξάνιου, τινάξτε για 3min, υποβάλτε σε φυγοκέντρωση σε 4000r/min επάνω από 20℃ για 10min
2) Απορρίψτε το υπερκείμενο νερό, πάρτε 100ul της μέσης λύσης στρώματος, προσθέστε 400ul του δείγματος που ξαναδιαλύει τη λύση, και το κούνημα καλά
3) Πάρτε 50μl για τη δοκιμή
Παράγοντας διαλύσεων: 25

 

5. Διαδικασίες της ELISA

5.1 οδηγίες για τη χρήση
1) Φέρτε τα αντιδραστήρια της ELISA στη θερμοκρασία δωματίου (20 - 25 °C) πριν τη χρήση.
2) Βάλτε το αντιδραστήριο της ELISA πίσω αμέσως στη μεταγενέστερη χρήση 2-8°C.
3) Η δυνατότητα αναπαραγωγής της διαδικασίας ανάλυσης της ELISA εξαρτάται κατά ένα μεγάλο μέρος από τη συνέπεια της πλύσης πιάτων, και η σωστή λειτουργία πλύσης πιάτων είναι η εστίαση του καθορισμού της διαδικασίας της ELISA.
4) Κατά τη διάρκεια όλων των διαδικασιών της σταθερής επώασης θερμοκρασίας, αποφύγετε το φως, και σφραγίστε το microplate με μια ταινία κάλυψης.

5.2 διαδικασίες λειτουργίας
1) Φέρτε την εξάρτηση δοκιμής στη θερμοκρασία δωματίου (20-25 ℃) για τουλάχιστον 30 λ., σημειώνει ότι κάθε αντιδραστήριο πρέπει να τιναχτεί ομοιόμορφα πριν τη χρήση
2) Βάλτε τις απαραίτητες μικροϋπολογιστής-καλά λουρίδες στα πλαίσια πιάτων. Ξανασφράγισε το αχρησιμοποίητο microplate, που αποθηκεύτηκε σε 2-8 ℃, παγωμένο.
3) Προετοιμασία λύσης: πάρτε το συγκεντρωμένο 20× πλένοντας απομονωτή 40ml, διαλύστε με το εξιοντισμένο νερό στις 1:19 (1 μέρος 20× συγκέντρωσε τον απομονωτή πλύσης + 19 μέρη εξιοντισμένου νερού), ή προετοιμαστείτε ως ποσότητα που απαιτείται.
4) Αρίθμηση: αριθμός τα μικροϋπολογιστής-φρεάτια σύμφωνα με τα δείγματα και την τυποποιημένη λύση κάθε δείγμα και η τυποποιημένη λύση πρέπει να εκτελεσθούν εις διπλούν καταγράψτε τις θέσεις τους.
5) Προσθέστε τα πρότυπα/το δείγμα: Προσθέστε 50 µL του δείγματος ή η τυποποιημένη λύση στα χωριστά διπλά φρεάτια, κατόπιν προσθέστε την ενζυμική κλίση, 50 µL/well κατόπιν λύση εργασίας αντισωμάτων, 50 µL/well. Το μίγμα ήπια με να τινάξει το πιάτο με το χέρι, σφραγίζει το microplate με τη μεμβράνη κάλυψης, επωάζει σε 25°C για 30 λ. στο σκοτάδι.
6) Πλύσιμο microplate: Προσεκτικά ανοίξτε το membrance κάλυψης, χύνει το υγρό από το microwell προσθέστε 250 µL/well του απομονωτή πλύσης, του πλυσίματος πλήρως για 4-5 φορές, 15-30 s κάθε φορά, κατόπιν πάρτε έξω και χτυπήστε για να ξεράνετε με το απορροφητικό έγγραφο. (Αχρησιμοποίητη λόγχη χρήσης για να διαπερνήσει τη φυσαλίδα μετά από ξηρό)
7) Χρωματισμός: προσθέστε 50 µL της λύσης λύσης έπειτα 50 µL Β υποστρωμάτων Α σε κάθε μια καλά. Μίγμα ήπια με να τινάξει το πιάτο με το χέρι, andincubate σε 25°C για 15min στο σκοτάδι για το χρωματισμό.
8) Προσδιορισμός: προσθέστε 50 µL της λύσης στάσεων σε κάθε μια καλά. Μίγμα ήπια με να τινάξει το πιάτο με το χέρι. Θέστε το μήκος κύματος του αναγνώστη microplate σε 450 NM για να καθορίσετε την αξία OD του κάθε καλά. (Συστήστε να διαβάσετε στην αξία OD στο διπλός-μήκος κύματος το 450/630 NM μέσα σε 5 λ.).

 

6. Κρίση αποτελέσματος

Υπάρχουν δύο μέθοδοι για να κρίνουν τα αποτελέσματα ο πρώτος είναι η τραχιά κρίση, ενώ ο δεύτερος είναι ο ποσοτικός προσδιορισμός. Σημειώστε ότι η αξία OD του δείγματος έχει έναν αρνητικό συσχετισμό με τη συνολική αφλατοξίνη στο δείγμα.

6.1 ποιοτικός προσδιορισμός
Το διάστημα συγκέντρωσης (ppb) μπορεί να ληφθεί από σύγκρινε τη μέση αξία απορροφητικότητας με τα πρότυπα. Υποθέστε την αξία απορροφητικότητας του δείγματος που κάποιο είναι 0,3, το δείγμα δύο είναι 1,0, και τα πρότυπα είναι: 0ppb 2,243 0.02ppb 1,816 0.06ppb 1,415 0.18ppb 0,74 0.54ppb 0,313 1.62ppb 0,155. Κατόπιν η συγκέντρωση του δείγματος ένα είναι στη σειρά 0.54ppb ~ 1.62ppb Το δείγμα δύο είναι 0.06ppb ~ 0.18ppb. Το διάστημα συγκέντρωσης της συνολικής αφλατοξίνης στα δείγματα μπορεί να ληφθεί από πολλαπλασιασμένος με την αντίστοιχη διάλυση του δείγματος.

6. 2 ποσοτική ανάλυση
Προκειμένου να υπολογιστεί η συγκέντρωση των δειγμάτων, μια τυποποιημένη καμπύλη πρέπει να γίνει. Προτού να γίνει η τυποποιημένη καμπύλη, η έννοια της απορροφητικότητας % πρέπει να είναι ξέρει.
Υπολογισμός της απορροφητικότητας %:

 

Ποσοστό της αξίας απορροφητικότητας =	Β	×100%
	B0

 

Η β-μέση αξία OD του δείγματος ή της τυποποιημένης λύσης.
B0-μέση αξία OD της τυποποιημένης λύσης 0 ng/mL.
Τα μηά πρότυπα γίνονται έτσι ίσα με 100% και οι τιμές απορροφητικότητας αναφέρονται στα ποσοστά. Οι τιμές που υπολογίζονται για τα πρότυπα εισάγονται σε ένα σύστημα των συντεταγμένων σε semilogarithmic χαρτί γραφικών παραστάσεων ενάντια στη συνολική συγκέντρωση αφλατοξίνης [ng/L]. Η συνολική συγκέντρωση αφλατοξίνης σε ng/L (ppb) που αντιστοιχεί στην απορροφητικότητα κάθε δείγματος μπορεί να διαβαστεί από την καμπύλη βαθμολόγησης.
Ένα ειδικό λογισμικό για την ανάλυση αποτελέσματος της ELISA θα διευκολύνει τους διπλούς ή πολλαπλάσιους προσδιορισμούς. Εάν χρειάζεστε, παρακαλώ καλέστε στο αίτημα.

7. Προφυλάξεις

1) Η θερμοκρασία δωματίου κάτω από 25 ℃ ή η θερμοκρασία του μη επιστροφής των αντιδραστηρίων και των δειγμάτων στη θερμοκρασία δωματίου (20-25 ℃) θα οδηγήσει σε μια χαμηλότερη τυποποιημένη αξία OD.
2) Η ξηρότητα του microplate στη διαδικασία πλύσης θα συνοδευθεί από τις καταστάσεις συμπεριλαμβανομένων των μη γραμμικών τυποποιημένων καμπυλών και της ανεπιθύμητης δυνατότητας αναπαραγωγής Έτσι συνεχίστε να περπατείτε έπειτα αμέσως μετά από την πλύση.
3) Μίγμα ομοιόμορφα πρίν προσθέτει οποιαδήποτε αντιδραστήρια.
4) Η λύση στάσεων είναι τα 2 Μ το διάλυμα που θειικού οξέος, αποφεύγει με το δέρμα.
5) Μην χρησιμοποιήστε την εξάρτηση που υπερβαίνει την ημερομηνία λήξης του. Η χρήση των αραιωμένων ή αλλοιωμένων αντιδραστηρίων από τις εξαρτήσεις θα οδηγήσει στις αλλαγές στην ευαισθησία και τις τιμές ανίχνευσης OD. Μην ανταλλάξτε τα αντιδραστήρια από τις εξαρτήσεις των διαφορετικών αριθμών μερών στη χρήση.
6) Αποθήκευση: κατάστημα σε 2-8 ℃, παγωμένο. Βάλτε το αχρησιμοποίητο microplate σε μια αυτόματος-σφραγίζοντας τσάντα για να το ξανασφραγίσετε. Η τυποποιημένη ουσία και το άχρωμο χρώμα προηγούμενες είναι φωτοευαίσθητες, και έτσι δεν μπορούν να εκτεθούν άμεσα στο φως.
7) Απορρίψτε τη λύση χρωματισμού με οποιοδήποτε χρώμα που δείχνει τον εκφυλισμό αυτής της λύσης. Η αξία ανίχνευσης (450/630nm) της τυποποιημένης λύσης 0 (ppb 0) λιγότερο από 0,5 ((A450nm<0> 8) Η βέλτιστη θερμοκρασία αντίδρασης είναι 25 ℃, και οι πάρα πολύ υψηλές ή πάρα πολύ χαμηλές θερμοκρασίες θα οδηγήσουν στις αλλαγές στις τιμές ευαισθησίας ανίχνευσης και OD.

8. Ημερομηνία αποθήκευσης και λήξης

Αποθήκευση: κατάστημα σε 2-8 ℃, παγωμένο.
Ημερομηνία λήξης: 12 μήνες η ημερομηνία της παραγωγής είναι στο κιβώτιο.
Σημείωση: Εάν Vacuum package του microplate έχει τη διαρροή, ισχύει ακόμα να χρησιμοποιήσει, δεν έχει επιπτώσεις στο αποτέλεσμα της δοκιμής, να είναι χαλαρώστε στη χρήση.

 

 

 

 

 

 

Q1: Πότε θα σταλεί;
Α1: Θα στείλουμε τα αγαθά για σας το συντομότερο δυνατό μέσα σε 7 εργάσιμες ημέρες μετά από να λάβουμε την πληρωμή. (Σε περίπτωση εξωτερικών παραγόντων όπως η επιδημία, την παράδοση μπορεί να καθυστερήσουν)

 

Q2: Υποστηρίζει OEM/ODM;
A2: Μπορεί να υποστηριχθεί, αλλά η συγκεκριμένη ποσότητα πρέπει να είναι περισσότερα από 100.000 κομμάτια, το οποίο είναι κατάλληλο για τα προσαρμοσμένα προϊόντα.

 

Q3: Πώς το εργοστάσιό σας κάνει από την άποψη του ποιοτικού ελέγχου;
A3: Έχουμε πιστοποιήσει εθνικά ISO9001 και ISO13485. Η διαδικασία παραγωγής μας προσαρμόζεται στις τυποποιημένες διαδικασίες για να εξασφαλίσει βέλτιστη ποιότητα των προϊόντων.

 

Q4: Πώς να παρέχει την υπηρεσία μεταπωλήσεων;
A4: Παρέχουμε την επαγγελματική σε απευθείας σύνδεση τεχνική υπηρεσία μεταπωλήσεων. Μπορούμε να παρέχουμε σε σας την καθοδήγηση ενών προς έναν μέσω του βίντεο, του τηλεφώνου, κ.λπ.

 

Q5: Ποια είναι η μέθοδος πληρωμής;
A5: Λαμβάνουμε την πληρωμή από T/T.

 

Q6: Πώς να στείλει;
A6: Επιλέξτε την καλύτερη μέθοδο ναυτιλίας για σας με να πάρει τα αποσπάσματα από τους πολλούς συνεταιριστικούς μεταφορείς μας, και επίσης το σκάφος σύμφωνα με τις απαιτήσεις σας.