Nitrofuran SEM ELISA εξάρτηση δοκιμής ασφαλείας των τροφίμων για την ευαισθησία 0.02ppb 96Wells/Kit γάλακτος

Nitrofuran SEM ELISA εξάρτηση δοκιμής ασφαλείας των τροφίμων για την ευαισθησία 0.02ppb 96Wells/Kit γάλακτος

 

1. Nitrofuran SEM ELISA αρχή εξαρτήσεων δοκιμής ασφαλείας των τροφίμων

 

Αυτή η εξάρτηση δοκιμής είναι βασισμένη ανταγωνιστικό ενζυμικό immunoassay για την ανίχνευση Nitrofuran (SEM) στο δείγμα. Τα αντιγόνα συζεύξεων είναι καλυμμένα προηγουμένως στα λωρίδες μικροϋπολογιστής-φρεατίων. Nitrofuran (SEM) στο δείγμα και τα αντιγόνα συζεύξεων που καλύπτονται προηγουμένως στα λωρίδες μικροϋπολογιστής-φρεατίων ανταγωνίζονται για τα αντισώματα αντι-SEM. Μετά από την προσθήκη της ενζυμικής κλίσης, το υπόστρωμα TMB προστίθεται για το χρωματισμό. Η αξία οπτικής πυκνότητας (OD) του δείγματος έχει έναν αρνητικό συσχετισμό με τα SEM σε το. Αυτή η αξία συγκρίνεται με την τυποποιημένη καμπύλη και η συγκέντρωση SEM λαμβάνεται στη συνέχεια.

 

2. Τεχνικές προδιαγραφές

 

Ευαισθησία: 0.02ppb

Θερμοκρασία επώασης: 25℃

Χρόνος επώασης: 30min~15min

Ιστός ορίου ανίχνευσης, αυγό, μέλι: 0.1ppb

Cross-reaction ποσοστό

SEM 100%

AMOZ < 0="">

AOZ < 0="">

AHD < 0="">

Ποσοστό αποκατάστασης

Ιστός 75±25%

Μέλι 70±20%

Αυγό 95±25%

 

3. Nitrofuran SEM ELISA τμήματα εξαρτήσεων δοκιμής ασφαλείας των τροφίμων

 

1	Μικροϋπολογιστής-καλά λουρίδες	12 λουρίδες με 8 μετακινούμενα φρεάτια κάθε ένα
2	6× τυποποιημένη λύση (1 μιλ. κάθε)	0ppb	0.02ppb
		0.06ppb	0.18ppb
		0.54ppb	1.62ppb
3	Ενζυμική κλίση	7ml	κόκκινη ΚΑΠ
4	Λύση εργασίας αντισωμάτων	7ml	μπλε ΚΑΠ
5	Υπόστρωμα Α	7ml	άσπρη ΚΑΠ
6	SubstrateB	7ml	μαύρη ΚΑΠ
7	Λύση στάσεων	7ml	κίτρινη ΚΑΠ
8	συγκεντρωμένος 20× πλένοντας απομονωτής	40ml	άσπρη ΚΑΠ
9	2× που συγκεντρώνεται εκ νέου διάλυση της λύσης	50ml	διαφανής ΚΑΠ
10	2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3)	10ml	μαύρη ΚΑΠ

 

4. Τα υλικά απαίτησαν αλλά παρεχόμενος

 

1) Εξοπλισμοί: microplate ο αναγνώστης, εκτυπωτής, homogenizer, άζωτο-ξεραίνοντας συσκευή, δίνη, υποβάλλει σε φυγοκέντρωση, η μέτρηση εισάγει στο σιφώνιο, ισορροπία (μια αμοιβαία ευαισθησία 0,01 γ), επωαστήρας, νερό - λουτρό

2) Micropipettors: απλού διαύλου 20-200µL, 100-1000µL, και πολυδιαυλικό 30~300µl

3) Αντιδραστήρια: NaOH, αιθυλικό οξικό άλας, νιτροεξάνιο, HCI (περ. 36,5%), K2HPO4·3H2O.

 

5. Προγενέστερη επεξεργασία δειγμάτων

 

Οδηγίες

Τα ακόλουθα σημεία πρέπει να εξεταστούν πριν από την προγενέστερη επεξεργασία οποιουδήποτε είδους δείγματος:

1) Μόνο οι μίας χρήσης άκρες μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τα πειράματα και τις άκρες πρέπει να αλλάξουν όταν χρησιμοποιούνται για να απορροφήσουν τα διαφορετικά αντιδραστήρια

2) Πριν από το πείραμα, κάθε πειραματικός εξοπλισμός πρέπει να είναι καθαρός και πρέπει να επαν-καθαριστεί εάν είναι απαραίτητο, προκειμένου να αποφευχθεί η μόλυνση που παρεμποδίζει τα πειραματικά αποτελέσματα.

Προετοιμασία λύσης πριν από την προγενέστερη επεξεργασία δειγμάτων:

1) 0,1 Μ K2HPO4: διαλύστε 11,4 γ K2HPO4·3H2O στο εξιοντισμένο νερό σε 500mL.

2) 1 HCL Μ: διαλύστε 8.6mL HCI (περ. 36,5%) στο εξιοντισμένο νερό σε 100mL.

3) 1 NaOH Μ: διαλύστε NaOH 4g στο εξιοντισμένο νερό σε 100mL.

4) το 2×concentrated που ξαναδιαλύει τη λύση είναι αραιωμένο με το εξιοντισμένο νερό στις 1:1 (1mL που συγκεντρώνεται εκ νέου διάλυση της λύσης + εξιοντισμένου του 1mL νερού), που χρησιμοποιούνται για την εκ νέου διάλυση δειγμάτων.

 

5.1 προετοιμασία δειγμάτων

a) Ιστός, αυγό

1) Ζυγίστε 1± 0.05g του ομογενοποιημένου δείγματος, προσθέστε 4mL του αποσταγμένου νερού, του 0.5mL 1 Μ HCI και του 100µL 2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3) σε κάθε σωλήνα, κούνημα κατάλληλα για 2min.

2) Επωάστε at37 ℃ κατά τη διάρκεια της νύχτας (ώρες approx16) ή επωάστε at56℃ από το νερό - λουτρό (2 ώρες).

3) Προσθέστε το αιθυλικό οξικό άλας 5mL 0.1M K2HPO4, 0.4mL 1M NaOH και 6mL σε κάθε σωλήνα, κούνημα για τη δεκαετία του '30.

4) Υποβάλτε σε φυγοκέντρωση σε ανωτέρω 4000r/min στη θερμοκρασία δωματίου (20-25 ℃) για 10min (εάν υπάρχει μετατροπή σε μορφή γαλακτώματος ή το στρώμα αιθυλικού οξικού άλατος δεν είναι αρκετό για 3ml, επωάζει το δείγμα στο νερό 80℃ - λουτρό για 10min και υποβάλλει επανειλημμένα ή η ταχύτητα αύξησης και παρατείνει το χρόνο του φυγοκεντρωτή).

5) Η μεταφορά 3mL του στρώματος αιθυλικού οξικού άλατος σε έναν νέο φυγοκεντρικό σωλήνα και εξατμίζει ώσπου να ξεραθεί αεροπορικώς το άζωτο ή σε 50℃.

6) Διαλύστε τα ξηρά υπολείμματα στο νιτροεξάνιο 2mL, προσθέστε 1mL της αραιωμένης λύσης εκ νέου διάλυσης, αναμίξτε κατάλληλα για 30 δευτερόλεπτα, υποβάλτε σε φυγοκέντρωση σε ανωτέρω 4000 r/min στη θερμοκρασία δωματίου (20-25 ℃) για 10 λ. Αφαιρέστε τη φάση νιτροεξάνιου επάνω-στρώματος (εάν υπάρχει μετατροπή σε μορφή γαλακτώματος, μετά από να αφαιρέσει τη φάση νιτροεξάνιου επάνω-στρώματος, επωάζει το δείγμα στο νερό 70℃ - λουτρό για 10-20min, φυγοκεντρωτής επανειλημμένα).

7) Πάρτε 50 µL του χαμηλότερου για την ανάλυση.

Πτυχές της διάλυσης του δείγματος: 2

b) Μέλι

1) Ζυγίστε 2± 0.05g του ομογενοποιημένου δείγματος (μέλι), προσθέστε 4mL του αποσταγμένου νερού, του 0.5mL 1 Μ HCI και των 100 µL 2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3) σε κάθε σωλήνα, κούνημα κατάλληλα για 2min.

2) Επωάστε at37 ℃ κατά τη διάρκεια της νύχτας (ώρες approx16) ή επωάστε at56℃ από το νερό - λουτρό (2 ώρες).

3) Προσθέστε το αιθυλικό οξικό άλας 5mL 0.1M K2HPO4, 0.4mL 1M NaOH και 6mL σε κάθε σωλήνα, κούνημα για τη δεκαετία του '30.

4) Υποβάλτε σε φυγοκέντρωση σε ανωτέρω 4000r/min στη θερμοκρασία δωματίου (20-25℃) για 10min (εάν υπάρχει μετατροπή σε μορφή γαλακτώματος ή το στρώμα αιθυλικού οξικού άλατος δεν είναι αρκετό για 3ml, επωάζει το δείγμα στο νερό 80℃ - λουτρό για 10min και υποβάλλει επανειλημμένα ή η ταχύτητα αύξησης και παρατείνει το χρόνο του φυγοκεντρωτή).

5) Η μεταφορά 3mL του στρώματος αιθυλικού οξικού άλατος σε έναν νέο φυγοκεντρικό σωλήνα και εξατμίζει ώσπου να ξεραθεί αεροπορικώς το άζωτο ή σε 50 ℃.

6) Διαλύστε τα ξηρά υπολείμματα στο νιτροεξάνιο 2mL, προσθέστε 1mL της αραιωμένης λύσης εκ νέου διάλυσης, αναμίξτε κατάλληλα για 30 δευτερόλεπτα, υποβάλτε σε φυγοκέντρωση σε ανωτέρω 4000r/min στη θερμοκρασία δωματίου (20-25 ℃) για 10 λ. Αφαιρέστε τη φάση νιτροεξάνιου επάνω-στρώματος (εάν υπάρχει μετατροπή σε μορφή γαλακτώματος, μετά από να αφαιρέσει τη φάση νιτροεξάνιου επάνω-στρώματος, επωάζει το δείγμα στο νερό 70℃ - λουτρό για 10-20min, φυγοκεντρωτής επανειλημμένα).

7) Πάρτε 50 µL του χαμηλότερου για την ανάλυση.

Πτυχές της διάλυσης του δείγματος: 1

 

6. Διαδικασίες της ELISA

 

6.1 οδηγίες

1) Φέρτε όλες τα αντιδραστήρια και μικροϋπολογιστής-καλά τις λουρίδες στη θερμοκρασία δωματίου (20-25 ℃) πριν τη χρήση

2) Επιστρέψτε όλα τα αντιδραστήρια αμέσως στη μεταγενέστερη χρήση 2-8 ℃

3) Η δυνατότητα αναπαραγωγής της ανάλυσης της ELISA, σε μεγάλο βαθμό, εξαρτάται από τη συνέπεια της πλύσης πιάτων. Η σωστή λειτουργία της πλύσης πιάτων είναι το σημείο κλειδί στη ELISA οι διαδικασίες

4) Για την επώαση στις σταθερές θερμοκρασίες, όλα τα δείγματα και τα αντιδραστήρια πρέπει να αποφύγουν την ελαφριά έκθεση, και κάθε microplate πρέπει να σφραγιστεί από τη μεμβράνη κάλυψης.

 

6.2 διαδικασίες λειτουργίας

1) Βάλτε την εξάρτηση στη θερμοκρασία δωματίου (20-25°C) για τουλάχιστον 30 λεπτά, σημειώνει ότι κάθε αντιδραστήριο πρέπει να τιναχτεί και να αναμιχθεί καλά πριν τη χρήση, και να βάλει τις απαραίτητες microwell λουρίδες στο πλαίσιο πιάτων. Τα αχρησιμοποίητα microplates πρέπει να ξανασφραγιστούν και να αποθηκευτούν σε 2-8°C, παγωμένο.

2) Προετοιμασία λύσης: Πάρτε 40 μιλ. συγκεντρωμένου του 20× πλένοντας απομονωτή και τον αραιώστε με το εξιοντισμένο νερό στις 1:19 (1 μέρος 20× συγκέντρωσε τον απομονωτή πλύσης + 19 μέρη του εξιοντισμένου νερού). Ή προετοιμαστείτε όπως απαιτείται.

3) Αρίθμηση: Αριθμός τα microwells σύμφωνα με τα δείγματα και τις τυποποιημένες λύσεις κάθε δείγμα και η τυποποιημένη λύση πρέπει να γίνουν εις διπλούν, και οι θέσεις τους πρέπει να καταγραφούν.

4) Προσθέστε 50µL του δείγματος ή της τυποποιημένης λύσης στα διπλά φρεάτια προσθέστε 50ul της ενζυμικής κλίσης σε κάθε μια καλά, κατόπιν προσθέστε 50µL της λύσης εργασίας αντισωμάτων, και τινάξτε το πιάτο που αναμιγνύει ήπια. Σφραγίστε το microplate με μια ταινία κάλυψης και επωάστε σε 25°C για 30min.

5) Χύστε έξω το υγρό στα microwells, κτυπά ελαφρά ξηρό σε απορροφητικό χαρτί, προσθέτει 250 μL/well του απομονωτή πλύσης για να πλύνει το πιάτο microwell για την 15-δεκαετία του '30, κατόπιν να πάρει έξω και να κτυπήσει ελαφρά ξηρό με το απορροφητικό έγγραφο, να επαναλάβει 4-5 φορές. (Εάν υπάρχουν αεροφυσαλίδες μετά από να τρυπήσουν, τις κόψτε μακριά με μια καθαρή άκρη).

6) Ανάπτυξη χρώματος: Προσθέστε 50 µL του υποστρώματος Α και 50 µL του υποστρώματος Β σε κάθε ένα καλά. Τινάξτε το πιάτο με το χέρι που αναμιγνύει ήπια και που επωάζει σε 25°C για 15 λ. στο σκοτάδι για την ανάπτυξη χρώματος.

7) Δοκιμή: Προσθέστε 50 μL της λύσης στάσεων σε κάθε μια καλά. Μίγμα ήπια με το τίναγμα του πιάτου με το χέρι. Θέστε το μήκος κύματος του αναγνώστη microplate σε 450 NM για να καθορίσετε την αξία OD κάθε μια καλά. (Συστήνεται να διαβαστεί η αξία OD στο διπλό μήκος κύματος 450/630nm μέσα σε 5 λεπτά).

 

7. Κρίση αποτελέσματος

 

Υπάρχουν δύο μέθοδοι για να κρίνουν τα αποτελέσματα: ο πρώτος είναι η τραχιά κρίση, ενώ ο δεύτερος είναι ο ποσοτικός προσδιορισμός. Σημειώστε ότι η αξία OD του δείγματος έχει έναν αρνητικό συσχετισμό με το περιεχόμενο των SEM.

7.1 ποιοτικός προσδιορισμός

Το διάστημα συγκέντρωσης (ng/mL) μπορεί να ληφθεί από τη σύγκριση της μέσης αξίας OD του δείγματος με αυτήν της τυποποιημένης λύσης. Να υποθέσουν ότι η αξία OD του δείγματοςⅠ είναι 0,3, και αυτό του δείγματος Ⅱ είναι 1.0ppb, η αξία OD των τυποποιημένων λύσεων είναι: 2,243 για 0ppb, 1,816 για 0.02ppb, 1,415 για 0.06ppb, 0,74 για 0.18ppb, 0,313 για 0.54ppb, 0,155 για 1.62ppb, κατά συνέπεια το διάστημα συγκέντρωσης του δείγματος Ⅰ είναι 0,54 σε 1.62ppb, και αυτό του δείγματος Ⅱ είναι 0,06 σε 0.18ppb.

7.2 ποσοτικός προσδιορισμός

Οι μέσες τιμές των τιμών απορροφητικότητας λαμβάνονται για τη μέση αξία OD (β) του δείγματος και της τυποποιημένης λύσης που διαιρούνται με την αξία OD (B0) της πρώτης τυποποιημένης λύσης (πρότυπα 0) και που πολλαπλασιάζονται στη συνέχεια με 100%, δηλ.,

Ποσοστό της αξίας απορροφητικότητας =	Β	×100%
	B0

Η β-μέση (διπλά φρεάτια) αξία OD του δείγματος ή της τυποποιημένης λύσης

B0-μέση αξία OD της τυποποιημένης λύσης 0ng/mL

Σύρετε την τυποποιημένη καμπύλη με τα ποσοστά απορρόφησης της τυποποιημένης λύσης και τις τιμές semilogarithm της τυποποιημένης λύσης SEM (ng/mL) ως Υ και Χ-άξονα, αντίστοιχα. Διαβάστε την αντίστοιχη συγκέντρωση του δείγματος από την τυποποιημένη καμπύλη με την ενσωμάτωση του ποσοστού απορρόφησής του στην τυποποιημένη καμπύλη. Η προκύπτουσα αξία πολλαπλασιάζεται στη συνέχεια με τις αντίστοιχες πτυχές διαλύσεων, λαμβάνοντας τελικά τη συγκέντρωση SEM στο δείγμα.

 

8. Προφυλάξεις

 

1) Εάν η θερμοκρασία δωματίου είναι χαμηλότερη από 25℃ ή τη θερμοκρασία αντιδραστηρίων και το δείγμα δεν επιστρέφει στη θερμοκρασία δωματίου (20-25℃), η τυποποιημένη αξία OD θα μειωθεί.

2) Κατά τη διάρκεια της διαδικασίας πλύσης, η ξήρανση του microplate θα συνοδευθεί από τη μη γραμμικότητα της τυποποιημένης καμπύλης, και η δυνατότητα αναπαραγωγής δεν είναι ιδανική επομένως, προχωρήστε στο επόμενο βήμα αμέσως μετά από την πλύση.

3) Το μίγμα καλά, διαφορετικά η δυνατότητα αναπαραγωγής θα είναι φτωχό.

4) Η λύση στάσεων είναι 2 Μ το διάλυμα που θειικού οξέος, αποφεύγει την επαφή δερμάτων.

5) Μην χρησιμοποιήστε την εξάρτηση πέρα από τη ζωή του προϊόντος στο ράφι. Η χρήση των αραιωμένων ή αλλοιωμένων αντιδραστηρίων από την εξάρτηση μπορεί να οδηγήσει στις αλλαγές στις τιμές ευαισθησίας και ανίχνευσης OD. Μην αντικαταστήστε τα αντιδραστήρια στις διαφορετικές batch εξαρτήσεων.

6) Ξανασφραγίστε τα αχρησιμοποίητα microplates ziplock στις τσάντες. Οι τυποποιημένες λύσεις και οι άχρωμοι συζευκτήρες είναι φωτοευαίσθητοι και δεν μπορούν να εκτεθούν άμεσα στο φως.

7) Απορρίψτε οποιαδήποτε λύση χρωματισμού το της οποίας χρώμα δείχνει ότι η λύση έχει υποβιβάσει. Μια αξία ανίχνευσης λιγότερο από 0,5 για την τυποποιημένη λύση 1 (ppb 0) δείχνει την υποβάθμιση.

8) Η βέλτιστη θερμοκρασία αντίδρασης είναι 25℃, και η ευαισθησία ανίχνευσης και η αξία OD θα αλλάξουν εάν η θερμοκρασία είναι πάρα πολύ υψηλή ή πάρα πολύ χαμηλή.

 

9. Ημερομηνία αποθήκευσης και λήξης

 

Αποθήκευση: Το κατάστημα σε 2-8°C, δεν παγώνει.
Ημερομηνία λήξης: 12 μήνες η ημερομηνία παραγωγής είναι στο κιβώτιο.
Σημείωση: Εάν οι διαρροές κενής συσκευασίας microplate, αυτό μπορούν ακόμα να χρησιμοποιηθούν χωρίς επιρροή των αποτελεσμάτων της δοκιμής, έτσι μπορείτε να το χρησιμοποιήσετε με αυτοπεποίθηση.

 

Q1: Πότε θα σταλεί;
Α1: Θα στείλουμε τα αγαθά για σας το συντομότερο δυνατό μέσα σε 7 εργάσιμες ημέρες μετά από να λάβουμε την πληρωμή. (Σε περίπτωση εξωτερικών παραγόντων όπως η επιδημία, την παράδοση μπορεί να καθυστερήσουν)

 

Q2: Υποστηρίζει OEM/ODM;
A2: Μπορεί να υποστηριχθεί, αλλά η συγκεκριμένη ποσότητα πρέπει να είναι περισσότερα από 100.000 κομμάτια, το οποίο είναι κατάλληλο για τα προσαρμοσμένα προϊόντα.

 

Q3: Πώς το εργοστάσιό σας κάνει από την άποψη του ποιοτικού ελέγχου;
A3: Έχουμε πιστοποιήσει εθνικά ISO9001 και ISO13485. Η διαδικασία παραγωγής μας προσαρμόζεται στις τυποποιημένες διαδικασίες για να εξασφαλίσει βέλτιστη ποιότητα των προϊόντων.

 

Q4: Πώς να παρέχει την υπηρεσία μεταπωλήσεων;
A4: Παρέχουμε την επαγγελματική σε απευθείας σύνδεση τεχνική υπηρεσία μεταπωλήσεων. Μπορούμε να παρέχουμε σε σας την καθοδήγηση ενών προς έναν μέσω του βίντεο, του τηλεφώνου, κ.λπ.

 

Q5: Ποια είναι η μέθοδος πληρωμής;
A5: Λαμβάνουμε την πληρωμή από T/T.

 

Q6: Πώς να στείλει;
A6: Επιλέξτε την καλύτερη μέθοδο ναυτιλίας για σας με να πάρει τα αποσπάσματα από τους πολλούς συνεταιριστικούς μεταφορείς μας, και επίσης το σκάφος σύμφωνα με τις απαιτήσεις σας.