Nitrofuran AMOZ ELISA γρήγορη εξάρτηση δοκιμής ασφαλείας των τροφίμων για την ευαισθησία 0.03ppb 96Wells/Kit γάλακτος

Nitrofuran AMOZ ELISA εξάρτηση δοκιμής ασφαλείας των τροφίμων για την ευαισθησία 0.03ppb 96Wells/Kit γάλακτος

 

1. Nitrofuran AMOZ ELISA αρχή εξαρτήσεων δοκιμής ασφαλείας των τροφίμων

 

Αυτή η εξάρτηση ανίχνευσης είναι βασισμένη ανταγωνιστικό ενζυμικό immunoassay για την ανίχνευση AMOZ στα δείγματα. Τα κλιμένα αντιγόνα είναι καλυμμένα προηγουμένως στις λουρίδες microwell. Το AMOZ στο δείγμα ανταγωνίζεται με το κλιμένο αντιγόνο που καλύπτεται προηγουμένως στη λουρίδα microwell για το αντίσωμα αντι-AMOZ. Αφότου προστίθεται η ενζυμική κλίση, το υπόστρωμα TMB προστίθεται για το λέκιασμα. Η αξία οπτικής πυκνότητας (OD) ενός δείγματος συσχετίζεται αρνητικά με το AMOZ σε το. Αυτή η αξία συγκρίνεται με μια τυποποιημένη καμπύλη και η συγκέντρωση AMOZ λαμβάνεται στη συνέχεια.

 

2. Τεχνικές προδιαγραφές

 

Ευαισθησία: 0.03ppb

Θερμοκρασία επώασης: 25℃

Χρόνος επώασης: 30min~15min

Ιστός ορίου ανίχνευσης, αυγό, μέλι: 0.1ppb

Cross-reaction ποσοστό

AMOZ 100%

AHD < 0="">

AOZ < 0="">

SEM < 0="">

Ποσοστό αποκατάστασης

Ιστός 80 ± 25%

Μέλι 75 ± 25%

Αυγό 95 ± 25%

 

3. Nitrofuran AMOZ ELISA τμήματα εξαρτήσεων δοκιμής ασφαλείας των τροφίμων

 

1	Μικροϋπολογιστής-καλά λουρίδες	12 λουρίδες με 8 μετακινούμενα φρεάτια κάθε ένα
2	6× τυποποιημένη λύση (1 μιλ. κάθε)	0ppb	0.03ppb
		0.09ppb	0.27ppb
		0.81ppb	2.43ppb
3	Ενζυμική κλίση	7ml	κόκκινη ΚΑΠ
4	Λύση εργασίας αντισωμάτων	7ml	μπλε ΚΑΠ
5	Υπόστρωμα Α	7ml	άσπρη ΚΑΠ
6	SubstrateB	7ml	μαύρη ΚΑΠ
7	Λύση στάσεων	7ml	κίτρινη ΚΑΠ
8	συγκεντρωμένος 20× πλένοντας απομονωτής	40ml	άσπρη ΚΑΠ
9	2× που συγκεντρώνεται εκ νέου διάλυση της λύσης	50ml	διαφανής ΚΑΠ
10	2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3)	2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3)	2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3)

 

4. Τα υλικά απαίτησαν αλλά παρεχόμενος

 

1) Εξοπλισμός: microplate ο αναγνώστης, εκτυπωτής, homogenizer, στεγνωτήρας αζώτου, vortexer, υποβάλλει σε φυγοκέντρωση, μετρώντας το σωλήνα, ισορροπία (αμοιβαίο 0.01g), επωαστήρας, νερό - λουτρό

2) Micropipette: ενιαίο κανάλι 20-200µL, 100-1000µL, πολυδιαυλικό 30-300µl

3) Αντιδραστήρια: NaOH, αιθυλικό οξικό άλας, νιτροεξάνιο, HCL (περίπου 36,5%), K2HPO4 3H2O.

 

5. Προγενέστερη επεξεργασία δειγμάτων

 

καθοδηγήστε

Τα ακόλουθα σημεία πρέπει να εξεταστούν πριν από οποιοδήποτε είδος προεπεξεργασίας δειγμάτων:

1) Το πείραμα μπορεί μόνο να χρησιμοποιήσει τις μίας χρήσης άκρες, και οι άκρες πρέπει να αντικατασταθούν κατά την απορρόφηση των διαφορετικών αντιδραστηρίων

2) Πριν από το πείραμα, ο πειραματικός εξοπλισμός πρέπει να καθαριστεί και να επαν-καθαριστεί εάν είναι απαραίτητο για να αποφύγει τη μόλυνση τα πειραματικά αποτελέσματα.

Προετοιμασία λύσης πριν από την προεπεξεργασία δειγμάτων:

1) 0,1 Μ K2HPO4: Διαλύστε 11,4 γ K2HPO4·3H2O στο εξιοντισμένο νερό σε 500 μιλ.

2) 1 HCL Μ: Διαλύστε 8,6 μιλ. του HCL (περίπου 36,5%) στο εξιοντισμένο νερό σε 100 μιλ.

3) 1 NaOH Μ: Διαλύστε 4 γ NaOH στο εξιοντισμένο νερό σε 100 μιλ.

4) Αραιό 2× συγκέντρωσε την εκ νέου διάλυση της λύσης με το εξιοντισμένο νερό στις 1:1 (1 μιλ. που συγκεντρώνεται εκ νέου διάλυση της λύσης + 1 μιλ. εξιοντισμένου νερού) για την εκ νέου διάλυση δειγμάτων.

 

5.1 προετοιμασία δειγμάτων

α) ιστός, αυγό

1) Ζυγίστε 1± 0.05g του ομογενοποιημένου δείγματος, προσθέστε 4mL του αποσταγμένου νερού, του 0.5mL 1 Μ HCI και του 100µL 2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3) σε κάθε σωλήνα, κούνημα κατάλληλα για 2min.

2) Επωάστε at37℃ κατά τη διάρκεια της νύχτας (ώρες approx16) ή επωάστε at56℃ από το νερό - λουτρό (2 ώρες).

3) Προσθέστε το αιθυλικό οξικό άλας 5mL 0.1M K2HPO4, 0.4mL 1M NaOH και 6mL σε κάθε σωλήνα, κούνημα για τη δεκαετία του '30.

4) Υποβάλτε σε φυγοκέντρωση σε ανωτέρω 4000r/min στη θερμοκρασία δωματίου (20-25 ℃) για 10min (εάν υπάρχει μετατροπή σε μορφή γαλακτώματος ή το στρώμα αιθυλικού οξικού άλατος δεν είναι αρκετό για 3ml, επωάζει το δείγμα στο νερό 80 ℃ - λουτρό για 10min και υποβάλλει επανειλημμένα ή η ταχύτητα αύξησης και παρατείνει το χρόνο του φυγοκεντρωτή).

5) Η μεταφορά 3mL του στρώματος αιθυλικού οξικού άλατος σε έναν νέο φυγοκεντρικό σωλήνα και εξατμίζει ώσπου να ξεραθεί αεροπορικώς το άζωτο ή σε 50℃.

6) Διαλύστε τα ξηρά υπολείμματα στο νιτροεξάνιο 2mL, προσθέστε 1mL της αραιωμένης λύσης εκ νέου διάλυσης, αναμίξτε κατάλληλα για 30 δευτερόλεπτα, υποβάλτε σε φυγοκέντρωση σε ανωτέρω 4000 r/min στη θερμοκρασία δωματίου (20-25 ℃) για 10 λ. Αφαιρέστε τη φάση νιτροεξάνιου επάνω-στρώματος (εάν υπάρχει μετατροπή σε μορφή γαλακτώματος, μετά από να αφαιρέσει τη φάση νιτροεξάνιου επάνω-στρώματος, επωάζει το δείγμα στο νερό 70 ℃ - λουτρό για 10-20min, φυγοκεντρωτής επανειλημμένα).

7) Πάρτε 50 µL του χαμηλότερου για την ανάλυση.

Πτυχές της διάλυσης του δείγματος: 2

b) Μέλι

1) Ζυγίστε 2± 0.05g του ομογενοποιημένου δείγματος (μέλι), προσθέστε 4mL του αποσταγμένου νερού, του 0.5mL 1 Μ HCI και των 100 µL 2-Nitrobenzaldehyde (C7H5NO3) σε κάθε σωλήνα, κούνημα κατάλληλα για 2min.

2) Επωάστε at37℃ κατά τη διάρκεια της νύχτας (ώρες approx16) ή επωάστε at56℃ από το νερό - λουτρό (2 ώρες).

3) Προσθέστε το αιθυλικό οξικό άλας 5mL 0.1M K2HPO4, 0.4mL 1M NaOH και 6mL σε κάθε σωλήνα, κούνημα για τη δεκαετία του '30.

4) Υποβάλτε σε φυγοκέντρωση σε ανωτέρω 4000r/min στη θερμοκρασία δωματίου (20-25℃) για 10min (εάν υπάρχει μετατροπή σε μορφή γαλακτώματος ή το στρώμα αιθυλικού οξικού άλατος δεν είναι αρκετό για 3ml, επωάζει το δείγμα στο νερό 80 ℃ - λουτρό για 10min και υποβάλλει επανειλημμένα ή η ταχύτητα αύξησης και παρατείνει το χρόνο του φυγοκεντρωτή).

5) Η μεταφορά 3mL του στρώματος αιθυλικού οξικού άλατος σε έναν νέο φυγοκεντρικό σωλήνα και εξατμίζει ώσπου να ξεραθεί αεροπορικώς το άζωτο ή σε 50 ℃.

6) Διαλύστε τα ξηρά υπολείμματα στο νιτροεξάνιο 2mL, προσθέστε 1mL της αραιωμένης λύσης εκ νέου διάλυσης, αναμίξτε κατάλληλα για 30 δευτερόλεπτα, υποβάλτε σε φυγοκέντρωση σε ανωτέρω 4000r/min στη θερμοκρασία δωματίου (20-25 ℃) για 10 λ. Αφαιρέστε τη φάση νιτροεξάνιου επάνω-στρώματος (εάν υπάρχει μετατροπή σε μορφή γαλακτώματος, μετά από να αφαιρέσει τη φάση νιτροεξάνιου επάνω-στρώματος, επωάζει το δείγμα στο νερό 70 ℃ - λουτρό για 10-20min, φυγοκεντρωτής επανειλημμένα).

7) Πάρτε 50 µL του χαμηλότερου για την ανάλυση.

Πτυχές της διάλυσης του δείγματος: 1

 

6. Διαδικασίες της ELISA

 

6.1 οδηγίες

1) Φέρτε όλες τα αντιδραστήρια και μικροϋπολογιστής-καλά τις λουρίδες στη θερμοκρασία δωματίου (20-25 ℃) πριν τη χρήση

2) Επιστρέψτε όλα τα αντιδραστήρια αμέσως στη μεταγενέστερη χρήση 2-8 ℃

3) Η δυνατότητα αναπαραγωγής της ανάλυσης της ELISA, σε μεγάλο βαθμό, εξαρτάται από τη συνέπεια της πλύσης πιάτων. Η σωστή λειτουργία της πλύσης πιάτων είναι το σημείο κλειδί στη ELISA οι διαδικασίες

4) Για την επώαση στις σταθερές θερμοκρασίες, όλα τα δείγματα και τα αντιδραστήρια πρέπει να αποφύγουν την ελαφριά έκθεση, και κάθε microplate πρέπει να σφραγιστεί από τη μεμβράνη κάλυψης.

6.2 διαδικασίες λειτουργίας

1) Φέρτε την εξάρτηση δοκιμής στη θερμοκρασία δωματίου (20-25 ℃) για τουλάχιστον 30 λ., σημειώνει ότι κάθε αντιδραστήριο πρέπει να τιναχτεί για να αναμίξει ομοιόμορφα πριν τη χρήση, έβαλε τις απαραίτητες μικροϋπολογιστής-καλά λουρίδες στα πλαίσια πιάτων. Ξανασφράγισε το αχρησιμοποίητο microplate, κατάστημα σε 2-8 ℃, παγωμένο.

2) Προετοιμασία λύσης: αραιό 40mL των 20 × συγκέντρωσε τον απομονωτή πλύσης με το εξιοντισμένο νερό στις 1:19 (1 μέρος 20 συγκεντρωμένος × πλένοντας απομονωτής + 19 μέρη εξιοντισμένου νερού). Ή προετοιμαστείτε όπως απαιτείται.

3) Αρίθμηση: αριθμός τα μικροϋπολογιστής-φρεάτια σύμφωνα με τα δείγματα και την τυποποιημένη λύση κάθε δείγμα και η τυποποιημένη λύση πρέπει να εκτελεσθούν εις διπλούν, να καταγράψουν τις θέσεις τους.

4) Προσθέστε 50µL του δείγματος ή της τυποποιημένης λύσης στα χωριστά διπλά φρεάτια προσθέστε το ένζυμο συζευγμένο έπειτα 50µL 50ul της λύσης εργασίας αντισωμάτων σε κάθε μια καλά, μίγμα ήπια με να τινάξει το πιάτο με το χέρι. Σφραγίστε το microplate με τη μεμβράνη κάλυψης, andincubate σε 25 ℃ for30min.

5) Χύστε το υγρό από το microwell, χτυπήστε για να ξεράνετε σε απορροφητικό χαρτί, να προσθέσετε 250 µL/well του απομονωτή πλύσης στο πλύσιμο microplate για την 15-δεκαετία του '30, κατόπιν να πάρει έξω και να χτυπήσετε για να ξεράνει με το απορροφητικό έγγραφο, επαναλάβετε 4-5 φορές. (Εάν υπάρχουν οι φυσαλίδες μετά από να χτυπήσουν, τις κόψτε με τις καθαρές άκρες).

6) Χρωματισμός: προσθέστε 50 µL του υποστρώματος Α και έπειτα 50 µL του υποστρώματος Β σε κάθε ένα καλά. Το μίγμα ήπια με να τινάξει το πιάτο με το χέρι, επωάζει έπειτα σε 25 ℃ για 15 λ. στο σκοτάδι για το χρωματισμό.

7) Προσδιορισμός: προσθέστε 50µL της λύσης στάσεων σε κάθε μια καλά. Μίγμα ήπια με να τινάξει το πιάτο με το χέρι. Θέστε το μήκος κύματος του αναγνώστη microplate σε 450nm για να καθορίσετε την αξία OD του κάθε καλά. (Συστήστε να διαβάσετε την αξία OD στο διπλός-μήκος κύματος 450/630nm μέσα σε 5 λεπτά).

 

7. Κρίση αποτελέσματος

 

Υπάρχουν δύο μέθοδοι για να κρίνουν τα αποτελέσματα: ο πρώτος είναι η τραχιά κρίση, ενώ ο δεύτερος είναι ο ποσοτικός προσδιορισμός. Σημειώστε ότι η αξία OD του δείγματος έχει έναν αρνητικό συσχετισμό με τη συγκέντρωση AMOZ.

7.1 ποιοτικός προσδιορισμός

Το διάστημα συγκέντρωσης (ng/mL) AMOZ μπορεί να ληφθεί από τη σύγκριση της μέσης αξίας OD του δείγματος με αυτήν της τυποποιημένης λύσης. Να υποθέσουν ότι η αξία OD του δείγματοςⅠ είναι 0,3, και αυτό του δείγματος Ⅱ είναι 1,0, η αξία OD των τυποποιημένων λύσεων είναι: 2,243 για 0ppb, 1,816 για 0.03ppb, 1,415 για 0.09ppb, 0,74 για 0.27ppb, 0,313 για 0.81ppb, 0,155 για 2.43ppb, κατά συνέπεια το διάστημα συγκέντρωσης του δείγματος Ⅰ είναι 0,81 σε 2.43ppb, και αυτό του δείγματος Ⅱ είναι 0,09 σε 0.27ppb.

7.2 ποσοτικός προσδιορισμός

Οι μέσες τιμές των τιμών απορροφητικότητας λαμβάνονται για τη μέση αξία OD (β) του δείγματος και της τυποποιημένης λύσης που διαιρούνται με την αξία OD (B0) της πρώτης τυποποιημένης λύσης (πρότυπα 0) και που πολλαπλασιάζονται στη συνέχεια με 100%, δηλ.,

Ποσοστό της αξίας απορροφητικότητας =	Β	×100%
	B0

Η β-μέση αξία OD του δείγματος ή της τυποποιημένης λύσης

B0-μέση αξία OD της τυποποιημένης λύσης 0 ng/mL

Σύρετε την τυποποιημένη καμπύλη με τα ποσοστά απορρόφησης της τυποποιημένης λύσης και τις τιμές semilogarithm της τυποποιημένης λύσης AMOZ (ng/mL) ως Υ και Χ-άξονα, αντίστοιχα. Διαβάστε την αντίστοιχη συγκέντρωση του δείγματος από την τυποποιημένη καμπύλη με την ενσωμάτωση του ποσοστού απορρόφησής του στην τυποποιημένη καμπύλη. Η προκύπτουσα αξία πολλαπλασιάζεται στη συνέχεια με τις αντίστοιχες πτυχές διαλύσεων, λαμβάνοντας τελικά τη συγκέντρωση AMOZ στο δείγμα.

 

8. Προφυλάξεις

 

1) Εάν η θερμοκρασία δωματίου είναι χαμηλότερη από 25℃ ή τη θερμοκρασία αντιδραστηρίων και το δείγμα δεν επιστρέφει στη θερμοκρασία δωματίου (20-25℃), η τυποποιημένη αξία OD θα μειωθεί.

2) Κατά τη διάρκεια της διαδικασίας πλύσης, η ξήρανση του microplate θα συνοδευθεί από τη μη γραμμικότητα της τυποποιημένης καμπύλης, και η δυνατότητα αναπαραγωγής δεν είναι ιδανική επομένως, προχωρήστε στο επόμενο βήμα αμέσως μετά από την πλύση.

3) Το μίγμα καλά, διαφορετικά η δυνατότητα αναπαραγωγής θα είναι φτωχό.

4) Η λύση στάσεων είναι 2 Μ το διάλυμα που θειικού οξέος, αποφεύγει την επαφή δερμάτων.

5) Μην χρησιμοποιήστε την εξάρτηση πέρα από τη ζωή του προϊόντος στο ράφι. Η χρήση των αραιωμένων ή αλλοιωμένων αντιδραστηρίων από την εξάρτηση μπορεί να οδηγήσει στις αλλαγές στις τιμές ευαισθησίας και ανίχνευσης OD. Μην αντικαταστήστε τα αντιδραστήρια στις διαφορετικές batch εξαρτήσεων.

6) Ξανασφραγίστε τα αχρησιμοποίητα microplates ziplock στις τσάντες. Οι τυποποιημένες λύσεις και οι άχρωμοι συζευκτήρες είναι φωτοευαίσθητοι και δεν μπορούν να εκτεθούν άμεσα στο φως.

7) Απορρίψτε οποιαδήποτε λύση χρωματισμού το της οποίας χρώμα δείχνει ότι η λύση έχει υποβιβάσει. Μια αξία ανίχνευσης λιγότερο από 0,5 για την τυποποιημένη λύση 1 (ppb 0) δείχνει την υποβάθμιση.

8) Η βέλτιστη θερμοκρασία αντίδρασης είναι 25℃, και η ευαισθησία ανίχνευσης και η αξία OD θα αλλάξουν εάν η θερμοκρασία είναι πάρα πολύ υψηλή ή πάρα πολύ χαμηλή.

 

9. Ημερομηνία αποθήκευσης και λήξης

 

Αποθήκευση: κατάστημα σε 2-8 ℃, παγωμένο.

Ημερομηνία λήξης: 12 μήνες η ημερομηνία της παραγωγής είναι στο κιβώτιο.

Σημείωση: Εάν Vacuum package του microplate έχει τη διαρροή, ισχύει ακόμα να χρησιμοποιήσει, δεν έχει επιπτώσεις στο αποτέλεσμα της δοκιμής, να είναι χαλαρώστε στη χρήση.

 

 

Q1: Πότε θα σταλεί;
Α1: Θα στείλουμε τα αγαθά για σας το συντομότερο δυνατό μέσα σε 7 εργάσιμες ημέρες μετά από να λάβουμε την πληρωμή. (Σε περίπτωση εξωτερικών παραγόντων όπως η επιδημία, την παράδοση μπορεί να καθυστερήσουν)

 

Q2: Υποστηρίζει OEM/ODM;
A2: Μπορεί να υποστηριχθεί, αλλά η συγκεκριμένη ποσότητα πρέπει να είναι περισσότερα από 100.000 κομμάτια, το οποίο είναι κατάλληλο για τα προσαρμοσμένα προϊόντα.

 

Q3: Πώς το εργοστάσιό σας κάνει από την άποψη του ποιοτικού ελέγχου;
A3: Έχουμε πιστοποιήσει εθνικά ISO9001 και ISO13485. Η διαδικασία παραγωγής μας προσαρμόζεται στις τυποποιημένες διαδικασίες για να εξασφαλίσει βέλτιστη ποιότητα των προϊόντων.

 

Q4: Πώς να παρέχει την υπηρεσία μεταπωλήσεων;
A4: Παρέχουμε την επαγγελματική σε απευθείας σύνδεση τεχνική υπηρεσία μεταπωλήσεων. Μπορούμε να παρέχουμε σε σας την καθοδήγηση ενών προς έναν μέσω του βίντεο, του τηλεφώνου, κ.λπ.

 

Q5: Ποια είναι η μέθοδος πληρωμής;
A5: Λαμβάνουμε την πληρωμή από T/T.

 

Q6: Πώς να στείλει;
A6: Επιλέξτε την καλύτερη μέθοδο ναυτιλίας για σας με να πάρει τα αποσπάσματα από τους πολλούς συνεταιριστικούς μεταφορείς μας, και επίσης το σκάφος σύμφωνα με τις απαιτήσεις σας.